Практическое пчеловодство (9)

Вспомним, что так называемая биуретовая реакция состоит в образовании соединения сине-фиолетового цвета между пелтидинными связями протеинов и Си++ (меди) в щелочной среде, причем интенсивность цвета прямо пропорциональна концентрации шолипептида.

Эта реакция протекает несложно и обеспечивает легко воспроизводимые результаты по определению общих протеинов в меде, сравнимых с полученными методом Къелыдаля.

Предлагаемый метод

Реактивы

1. Раствор <вольфрамата натрия 10% '? Вольфрамат натржя 10 г Дистиллированная йода 100 мл Холодный раствор

2. Раствор нормальной серной кислоты 2/3 '(0,66 N) : Изготовляется путем добавления двух частей нормальной серной

кислоты к одной части (дистиллированной воды. Также можно растворять непосредственно 18,50 мл серной кислоты (D^l,84) в достаточном количестве дистиллированной воды, до общего объема в 1000 мл.

3. Стабилизованная вольфрамовая кислота:

Смешивают 100 мл вольфрамата натрия 10о/о с 100 мл серной кислоты 2/3 N и добавляют 0,05 мл концентрированной фосфорной кислоты.

4. Физиологический раствор.

5. Раствор гидроокиси натрия 3%.

6. Биуретовый реагент (Горнал, Бардауилл и Дейвид) :

Пентагидрат сульфата меди 1,5 г

Битартрат натрия и калия 1 г

Йодистый калий 1 г

Гидроокись натрия 10% 300 одл

Дистиллированная вода 1000 мл

В калиброванной колбе емкостью 1 литр растворяют примерно 500

мл дистиллированной воды, битартрат натрия и калия и йодистый калий.

Отдельно растворяют в 100 мл дистиллированной воды сульфат

меди, к которому добавляют содержимое колбы; наконец добавляют

раствор гидроокиси натрия и королю взбалтывают.

Пополняют дистиллированной водой до 1000 мл. Бели появляется черный или красноватый осадок, реактив нужно выбросить и изготовить другой.

Аппаратура

1. Фото колориметр.

2. Центрифуга.

Метод

В лреципитационный сосуд емкостью 50 мл, с иавестным весом, юмещают ровно 5 г тщательно гомогенизированной пробы меда, подлежащего анализу, добавляют 2 мл дистиллированной воды и тщательно перемешивают. При необходимости смесь слепка нагревают.

Раствор помещают в калиброванную 10-миллилитровую трубку для центрифуги, прополаскивают сосуд дистиллированной водой, которую также выливают в трубку, затем приступают к преципитации имеющихся протеинов следующим образам: добавляют 2 мл реагента из концентрированной и стабилизованной тунтстеновой кислоты и дополняют дистиллированной водой до 10 мл.

Взбалтывают, затем дают ему отстояться не!сколько .минут, до коагуляции протеинов, 'затем центрифугируют при 300 об/мин., в течение 10 мин.

Отстаивают и растворяют осадок 3% раствором гидроокиси натрия до дополнения d мл в калиброванной трубке.

Трубки фотоколориметра отмечают В (слепой контроль) и Р (проба для анализа).

Что такое эковата цена.

Страницы: 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 21 22 23 24 25 26 27 28 29 30 31 32 33 34 35 36 37 38 39 40 41 42 43 44 45 46 47 48 49 50 51 52 53 54 55 56 57 58 59 60 61 62 63 64 65 66 67 68 69 70 71 72 73 74 75 76 77 78 79 80 81 82 83

Опубликовано 23 Март 2010 в рубрике Исторические статьи

Дополнительный материал по этой теме:

Новое на сайте: