загрузка...

Практическое пчеловодство (9)

Вспомним, что так называемая биуретовая реакция состоит в обра­зовании соединения сине-фиолетового цвета между пелтидинными связя­ми протеинов и Си++ (меди) в щелочной среде, причем интенсивность цвета прямо пропорциональна концентрации шолипептида.

Эта реакция протекает несложно и обеспечивает легко воспроизво­димые результаты по определению общих протеинов в меде, сравнимых с полученными методом Къелыдаля.

Предлагаемый метод

Реактивы

1.  Раствор <вольфрамата натрия 10% '? Вольфрамат натржя              10     г Дистиллированная йода     100 мл Холодный раствор

2.  Раствор нормальной серной кислоты 2/3 '(0,66 N) : Изготовляется путем  добавления двух  частей  нормальной  серной

кислоты к одной части (дистиллированной воды. Также можно растворять непосредственно 18,50 мл серной кислоты (D^l,84) в достаточном коли­честве дистиллированной воды, до общего объема в 1000 мл.

3.  Стабилизованная вольфрамовая кислота:

Смешивают 100 мл вольфрамата натрия 10о/о с 100 мл серной кис­лоты 2/3 N и добавляют 0,05 мл концентрированной фосфорной кислоты.

4.  Физиологический раствор.

5.  Раствор гидроокиси натрия 3%.

6.  Биуретовый реагент (Горнал, Бардауилл и Дейвид) :

Пентагидрат сульфата меди                1,5     г

Битартрат натрия и калия                    1     г

Йодистый калий                                     1     г

Гидроокись натрия 10%                     300 одл

Дистиллированная вода                     1000 мл

В калиброванной колбе емкостью 1 литр растворяют примерно 500

мл дистиллированной воды, битартрат натрия и калия и йодистый калий.

Отдельно  растворяют  в   100  мл  дистиллированной   воды  сульфат

меди,  к  которому добавляют содержимое   колбы;   наконец   добавляют

раствор гидроокиси натрия и королю взбалтывают.

Пополняют дистиллированной водой до 1000 мл. Бели появляется черный или красноватый осадок, реактив нужно выбросить и изготовить другой.

Аппаратура

1.  Фото колориметр.

2.  Центрифуга.

Метод

В лреципитационный сосуд емкостью 50 мл, с иавестным весом, юмещают ровно 5 г тщательно гомогенизированной пробы меда, подле­жащего анализу, добавляют 2 мл дистиллированной воды и тщательно перемешивают. При необходимости смесь слепка нагревают.

Раствор помещают в калиброванную 10-миллилитровую трубку для центрифуги, прополаскивают сосуд дистиллированной водой, которую также выливают в трубку, затем приступают к преципитации имеющихся протеинов следующим образам: добавляют 2 мл реагента из концентри­рованной и стабилизованной тунтстеновой кислоты и дополняют дистил­лированной водой до 10 мл.

Взбалтывают, затем дают ему отстояться не!сколько .минут, до коагу­ляции протеинов, 'затем центрифугируют при 300 об/мин., в течение 10 мин.

Отстаивают и растворяют осадок 3% раствором гидроокиси натрия до дополнения d мл в калиброванной трубке.

Трубки фотоколориметра отмечают В (слепой контроль) и Р (про­ба для анализа).

Страницы: 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 21 22 23 24 25 26 27 28 29 30 31 32 33 34 35 36 37 38 39 40 41 42 43 44 45 46 47 48 49 50 51 52 53 54 55 56 57 58 59 60 61 62 63 64 65 66 67 68 69 70 71 72 73 74 75 76 77 78 79 80 81 82 83

Опубликовано 23 Март 2010 в рубрике Исторические статьи

Дополнительный материал по этой теме:


Новое на сайте:

2009-2020 © журнал "Прополис". Все права защищены.
Перепечатка или любое другое коммерческое использование материалов сайта возможно только с разрешения редакции.