Про разведение пчел (11)

Тонкослойную хроматографию производили на пластинках 20x20 см, покрытых силпкателем Н и активированных в течение часа при 110°. Используемая система миграции — смесь циклогексан-ацетата этилхлороформа 40 : 15 : 1. Проявляли молибденовой кислотой Юо/о в метаноле и нагревали 5—10 минут до 120°.

Во второй серии опытов мы попытались исследовать наличие в прополисе 'протеиновых соединений и (производных нуклеиновых кислот — рибонуклеиновой и дезоксирибонуклеиновой.

2 г прополиса обрабатывают пятикратно 5 мл ацетона в течение 20 дней при комнатной температуре, в защищенном от света месте. Аце-тонные авытянаки удаляют. Затем следует обработка остатка прополиса этанолом в течение 16 часов, затем метанолом в течение 72 ч. Прополис, обработанный таким образом, пропускают через фильтровальную бумагу, несколько раз промывают этанолом и выпаривают до полного

сушения. Эту фракцию прополиса, из которой удалили соединения, растворимые в вышеупомянутых органических растворителях, — серовато-белый продукт, меченый как фракция F. Эту фракцию проанализировали для обнаружения протеиновых соединений и производных нуклеиновых кислот.

С этой целью 100 мг фракции F экстрагировали 3 мл бидистилли-рованной воды с рН 8 в течение часа. В полученном фильтрате (IF) произвели реакцию Мейбаума с орцинолем (6), реакцию Диша с дифениламином i(2), адсорбцию в ультрафиолетовых Л(учах от 370 вшг до 230 мкг и электрофорез на полиакриламидном геле.

Для реакции Мейбаума пробы производили 0,6 мл фильтрата и 0,2 мл реагента Мейбаума, а для реакции Диша использовали 0,6 мл фильтрата и 0,6 1мл реагента Диша.

Электрофорез на полиакриламидном геле производили 0,2 мл фильтрата в трубке, буферный раствор трис-борной кислоты рН 8,2, время миграции — 3 часа 30 мин. Проявляли черным крахмалом.

Отдельно брали 50 мг фракции F, которую экстрагировали 2 мл трихлоруксусной кислоты в течение 15 минут при 90° по Шнейдеру (9).

После центрифугирования в надосадочной жидкости (II F) производили реакции Мейбаума и Дпша и адсорбцию в ультрафиолетовых лучах.

В последней серип опытов мы попытались обнаружить в прополисе соединения, растворимые в органических растворителях, а именно в хлороформе и метаноле.

6 г прополиса обрабатывают два раза в течение 48 часов хлороформом при комнатной температуре, в защищенном от света месте. Объединенные вытяжки образуют хлороформную фракцию (С).

Другую пробу шршимшса экстрагировали метанолом т таких же условиях. Эта вытяжка — метаноловая фракция (Н).

Эти две фракции проанализировали при помощи круговой хроматографии на (бумаге и тонкослойной хроматографии.

Результаты и обсуждение

Результаты наших исследований выявили сложность химического состава проанализированного нами прополиса.

Страницы: 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 21 22 23 24 25 26 27 28 29 30 31 32 33 34 35 36 37 38 39 40 41 42 43 44 45 46 47 48 49 50 51 52 53 54 55 56 57 58 59 60 61 62 63 64 65 66 67 68 69 70 71 72 73 74 75 76 77 78 79 80 81 82 83 84 85 86 87 88 89 90

Опубликовано 23 Март 2010 в рубрике Исторические статьи

Дополнительный материал по этой теме:

Новое на сайте: