Советы пчеловодам (10)

Смешанную хлороформную вытяжку отдельно промывают в другой делительной ворошке двухкратно, используя каждый раз по J.5 мл кипяченной и охлажденной дистиллированной воды путем взоалтывания в течение 5 минут. Сепарируют воду, используемую для промывки, затем используют ее дальше, для водных вытяжек из осадка, оставшегося в сепарапдонной лейке.

// _ Водная вытяжка.

Осадок оставшийся после хлороформной вытяжки, подвергают водному экстрагированию, используя для первых двух экстрагирований воду от промыва хлороформной вытяжки. Время взбалтывания для каждого экстрагирования 15 минут.

После каждого экстрагирования отделяют водную фазу и при необходимости пропускают ее через небольшой фильтр диаметрам 3 ом. Необходимо работать осторожно, с тем, чтобы на фильтр попало как можно меньше осадка, предназначенного для экстрагирования. Отстоявшуюся и пропущенную через фильтр жидкость собирают во флакон из темного стекла, с притертой пробкой. Экстрагирование -повторяют еще два раза, используя каждый раз по 10 мл вскипяченной и охлажденной дистиллированной воды, взбалтывая каждый раз по 15 минут, сепарируя таким же образом и пропуская через тот же фильтр. Последнее экстрагирование производят помещая в воронку фильтр вместе с 1U мл воды Взбалтывают и пропускают через фильтр первые четыре вытяжки, гомогенизируют их и метят гомогенизат как V_r. Определяют объем вытяжки и помещают ее в холодильник.

/// — Количественное определение веществ-доноров водорода и активности трансгидрогеназ вытяжки прополиса.

Определение производят сравнительно с контрольным веществом, в растворе известной концентрации (в нашем случае раствор резорцина 0,1%) • ,.

Условия рН создаются буферным раствором, ан-аэрооные условия работы обеспечивают при помощи слоя парафинового масла, а условия температуры — в термостате (при 37°С).

Учет показателей производят через точные промежутки времени до появления слабого окрашивания, причем акцептор Н+ является и индикатором цвета.

С этой же целью используют и пробирки с равным диаметрам (лучше всего 16 мм) из стекла одинакового качества.

Метод использует для получения необходимых значений две схемы, а именно: схему I (ориентировочную) и схему II (корректирующую).

Первая часть схемы содержит 7 вертикальных столбцов, пересекающих горизонтальные строчки, количество которых равно взятым в опыт пробам. Переменные величины схемы выражают мл вытяжки, мл контрольного раствора и мл акцептора. Буферный раствор соотносится с вытяжкой, а для пополнения всех пробирок используется одинаковый объем воды.

Во второй части схемы I содержатся данные, свидетельствующие об интенсивности обесцвечивания в течение разных промежутков времени.

Страницы: 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 21 22 23 24 25 26 27 28 29 30 31 32 33 34 35 36 37 38 39 40 41 42 43 44 45 46 47 48 49 50 51 52 53 54 55 56 57 58 59 60 61 62 63 64 65 66 67 68 69 70 71 72 73 74 75 76 77 78 79 80 81 82 83 84 85 86 87 88 89 90

Опубликовано 23 Март 2010 в рубрике Исторические статьи

Дополнительный материал по этой теме:

Новое на сайте: